1. 研究目的与意义
磷脂酰胆碱（Phosphatidyl cholines，PC）是一种两性分子，由亲水的头部和疏水的尾部组成，是磷脂的一种，在头部插有一个胆碱基团。磷脂酰胆碱是生物膜的重要组成部分，从各种各样的源头都可以很容易地提取，例如蛋黄和大豆，而提取时通常使用的试剂是己烷。磷脂酰胆碱还是动物和植物组织内棕色脂肪的重要组成成分。大多数细菌细胞不含磷脂酰胆碱，比如大肠杆菌。纯化的磷脂酰胆碱常被用作一些经济商业方面的用途。
本次设计进行以下合成磷脂的质量研究：
二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱，DMPC（CAS号：18194-24-6），英文名1,2-Dimyristoyl- sn-glycero-3-phosphocholine。
2. 课题关键问题和重难点
对于磷脂的质量分析中的关键问题是分析方法中磷脂液相条件的确定、标准曲线及线性回归方程的确定、磷脂样品组分的定性定量分析、仪器精密度的考查、检出限、定量限的确定、方法专属性的考察。
选用高效液相色谱仪配备ELSD检测器和ZORBAX Eclipse Plus (1504.6mm，3.5m) 或与之相当的色谱柱（流动相A：准确称取醋酸铵47.4mg，加入水1000mL，溶解，用醋酸调节pH=4，混匀，然后用0.45um水相滤膜真空抽滤，超声振荡20min脱气。流动相B： 准确称取醋酸铵308mg，加入1000mL甲醇，溶解，混匀，然后用0.45um有机滤膜真空抽滤，超声振荡20min脱气。在此基础上根据实际出峰情况对流动相配比进行微调）。
标准曲线及线性回归方程：配制一定浓度的二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱（DMPC）、肉豆蔻酸对照品、溶血磷脂酰胆碱对照品混合溶液及DMPC标准储备溶液。用标准储备溶液按比稀释成线性溶液。浓度根据测出的检测限来确定，分别进样，经HPLC分析后绘制标准曲线，得到线性回归方程和相关系数。
3. 国内外研究现状（文献综述）
摘要：磷脂是细胞膜的重要结构组成成分，是许多生理活性物质的前体物质，还发挥着细胞信号传导，细胞增殖，细胞凋亡等作用。研究表明许多疾病与磷脂的代谢异常有关，对磷脂的分析有助于疾病的诊断和治疗，对磷脂的研究已经成为医学，生物和药学等众多学科的研究热点，因为磷脂结构复杂，种类繁多，对磷脂的分析一直比较困难，随着分析技术的不断进步，特别是质谱技术，文献报道应用HPLC-ESI-MS 进行磷脂分析的报道也越来越多。
关键词：磷脂；磷脂酰胆碱；质量分析
磷脂（Phospholipids）不仅维持细胞膜的正常形态，还参与生物体大量的生命活动，具有非常重要的生理意义。其中磷脂在信号传导，物质交换，细胞凋亡和增殖等方面发挥了重要作用l，如甘油磷脂是脂质第二信使的前体；磷脂代谢产物在发热，炎症反应和血小板聚集等方面也发挥了重要作用，如花生四烯酸，前列腺素，血小板活化因子等。分子生物学研究表明磷脂是人体内重要的生物活性物质及信息分子前体的贮备形式，其水解产物和氧化产物可以通过影响分泌或神经系统来调节人体代谢，改善记忆力等，也是许多疾病形成的化学介质。另外，据报道，很多疾病都与磷脂代谢异常有关2，如糖尿病3，阿兹海默病2，胰腺癌4等。因此，近年来，针对磷脂的结构、功能、代谢等研究已经成为生物学、医学、药学的研究热点。
4. 研究方案
仪器与试剂：高效液相色谱仪、电子天平、超纯水等
1、专属性
配制一定浓度的溶血磷脂酰胆碱溶液、肉豆蔻酸溶液、DMPC供试品定位溶液及专属性溶液。待系统平衡后，先进1针空白，然后进1针专属性溶液，评估系统适用性。待系统适用性通过后，分别进上述4种溶液，观察各溶液保留时间。
5. 工作计划
周次 | 工作内容 |
1 | （1）按指导教师指定的英文原文进行翻译，完成翻译工作； （2）检索与阅读相关专业文献，写出文献综述，按时提交开题报告。 |
2～3 | （1）大量查阅文献，初步确立DMPC的分析检测方法（确定色谱柱、检测器类型、流动相、柱温等色谱条件）； （2）学习有关仪器的基本操作、实验规范与相关知识。 |
4～6 | （1）按初定的实验方案对注射用磷脂样品进行质量分析，根据实验结果对分析条件进行优化（调节流动相配比、流速等参数，保证分离度等满足测定要求，确保检测结果满足2022版中国药典的要求）； （2）继续查阅文献，对实验中出现的问题进行分析，对分析条件进行优化。 |
7～8 | （1）继续对分析方法进行优化，对方法的专属性进行研究； （2）确定方法的检测限与定量限以及线性范围； （3）对本实验室精制相关注射用磷脂样品进行测定，以面积归一化法表示纯度，考察样品纯度及主要共存杂质能否检出。 |
9 | 完成论文初稿 |
10 | 反复修改、完善论文 |
11 | 毕业论文定稿并打印装订成册，毕业论文答辩资格审查，答辩 |
12 | 规范化检查、评定成绩 |
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