1. 研究目的与意义
乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB)是一类可利用碳水化合物发酵产生大量乳酸的球状、类球状、短杆或杆状细菌,多为革兰氏阳性,也有具阳性细胞壁型的阴性菌。
乳酸菌早在4000年前就有被古人使用的历史,直到1905年梅契尼柯夫(Elie Metchnikoff)撰写的《长寿说》,提出了乳酸菌与长寿之间的关系,并于1911年提出益生菌的概念;2002年,WHO定义益生菌:活的微生物,摄入足够数量后,对宿主产生一种或多种特殊且经论证的健康益处。
目前,益生乳酸菌对人体健康的益处有促进营养分解及吸收、增强机体免疫力、维持和改善机体正常功能、平衡肠道菌群等益处,但乳酸菌要有足够多的数量106CFU/mL(GB 7101-2015 食品安全国家标准 饮料)以上,并且以活的通过胃酸、并到达肠道,才能表现出很好的保健功能。
2. 文献综述
乳酸菌及其应对酸胁迫的研究进程摘要乳酸菌是动物肠道中极为重要的生理菌群之一,无毒、无副作用,担负着人畜机体多种重要的生理功能。
本文简要介绍了乳酸菌的生物学特性和几种生理功能,乳酸菌应对酸胁迫的研究及其发展前景。
关键词:乳酸菌 生理功能 酸胁迫 前景一.概述乳酸菌是一群能从可发酵性碳水化合物中产生大量乳酸的革兰氏阳性细菌的通称,广泛存在于人、畜、禽肠道、许多食品、物料及少数临床样品中。
3. 设计方案和技术路线
1.通过平皿复苏和液体培养方法培养所需菌种:植物乳杆菌CICC23133;鼠李糖乳杆菌CICC6158、6159、6161;德式乳杆菌保加利亚亚种CICC6103、干酪乳杆菌CICC6114(恒康公司菌种库中保存)2.菌种的形态特征鉴定3.建立体外模型①人体胆盐环境配制:添加猪胆盐使其浓度为0.3%②人工胃液配制:稀盐酸、水、胃蛋白酶按比例混合③人工肠液配制:磷酸二氢钾、水、胰酶按比例混合4.抗性研究试验①耐胆盐试验:采用0.3%浓度的胆盐作为筛选耐受肠道内胆盐的乳酸菌的标准,恒温培养,前后对照,建立实验组与对照组。
实验组:PBS缓冲液(PH=8.0)和0.3%胆盐对照组:PBS缓冲液(PH=8.0)不加胆盐②耐人工胃液试验(耐酸试验):菌悬液加入人工胃液中培养2h,时间前后对照,合适梯度计数。
计算公式:存活率(%)=2h菌落数/0h菌落数100%,计算出存活率。
4. 工作计划
1.20-1.31 查阅并整理文献资料3.1-3.7 完成开题报告,实验方案制定3.8-5.31进行课题实验研究6.1-6.9 完成毕业论文设计
5. 难点与创新点
乳酸菌对人类身体的有益调节和保健功能已逐渐被人们所认可,目前,很多国家正对乳酸菌的选育工作进行深入研究,但国内报道甚少。
本课题主要通过建立体外模拟胃肠环境,将六种乳酸菌放进体外模型中进行比较,以筛选出能够耐受人体环境的优良乳酸菌,为生产商提供合适的乳酸菌。
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