1. 研究目的与意义
一、研究内容1.枸杞基因组DNA的提取和检测：预处理、培养、提取、纯化、检测；2. MSAP体系优化及建立：酶切体系优化、基因组DNA酶切量的优化、酶切时间的优化、连接体系的优化、预扩增反应体系的优化、选择性扩增反应体系的优化、引物的筛选；3. MSAP体系的结果分析：选扩产物的聚丙烯酞氨凝胶电泳、银染、数据分析和统计4. 枸杞基因组DNA甲基化与枸杞品质（产地）的联系：随机选用宁夏、甘肃、内蒙和青海四个产地的枸杞为模型，研究不同产地的枸杞基因组DNA甲基化水平，探寻DNA甲基化与枸杞品质之间的联系。
二、研究意义枸杞为茄科（Solanacea）枸杞属（Lycium Linn）多年生灌木植物，全球该属物种有80多种。
枸杞的成熟干燥果实（中药称枸杞子）为我国的传统名贵中药材，味甘、性平，具有滋肾，润肺，补肝，明目等功效，《神农本草经》将其列为上品，是我国宝贵的药食同源型植物资源。
2. 文献综述
植物基因组DNA甲基化的MSAP研究进展陆瑞华南京中医药大学药学院 摘 要：DNA甲基化作为一种重要的表观遗传学修饰方式，广泛存在于动物细胞和植物体中。
很多研究表明DNA甲基化不仅可以保护基因组免受外来插入序列的侵害，而且能起到调节基因表达的作用。
甲基化敏感扩增多态性法(MSAP)作为一种较新兴的DNA甲基化检测技术，近年来广泛应用于动植物基因组DNA甲基化研究中。
3. 设计方案和技术路线
一、文献的查阅查阅与本实验相关的文献，确定课题研究方向并提出立题依据，包括研究意义和前景，国内外研究情况、水平和未来发展趋势，特色或创新之处。
二、实验计划初步规划1、枸杞基因组DNA的提取和检测取种→新洁尔灭和乙醇消毒→MS培养基培养→植物基因组DNA提取试剂盒提取→核酸浓度检测→琼脂糖凝胶电泳→DNA纯化回收试剂盒纯化回收→核酸浓度检测→获得高浓度及高纯度的枸杞基因组DNA。
2、MSAP体系优化及建立选取宁夏、甘肃、内蒙和青海四个产地的混合枸杞初步探索建立MSAP的检测体系。
4. 工作计划
第一阶段：2022年1月~2月 文献查阅，确定研究方向，规划实验方案；第二阶段：2022年3月~4月 枸杞基因组DNA的提取和检测，确定实验方案并进行实验；MSAP体系优化及建立，初步探索实验方案及实验条件并进行实验；MSAP体系的结果分析，初步探索实验方案及实验条件；第三阶段：2022年4月~5月 MSAP体系的结果分析，确定实验方案并进行实验；提取宁夏、甘肃、内蒙和青海四个产地的枸杞的DNA进行MSAP检测，实现实验的重复性；第四阶段：2022年6月 整理实验方案和数据，总结撰写论文。
5. 难点与创新点
研究人员对枸杞的研究已有十多年时间，但研究多集中于枸杞多糖，对枸杞DNA甲基化的研究较少。
近年来研究表明DNA甲基化不仅可以植物体保护基因组免受外来插入序列的侵害，而且调节基因表达。
在过往的研究方法中，一般采用ISSR(Inter-simple sequence repeat)标记、相关序列扩增多态性(Sequence-related amplified polymorphism,SRAP)等方法来研究枸杞DNA甲基化。
以上是毕业论文开题报告，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
