1. 研究目的与意义
内容：建立符合中医化瘀止血治法客观表征出血症的体外生物效应评价体系，采用氧化低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞损伤模型，给予茜草炭各待评价的不同溶剂提取物，进行活性筛选。
通过倒置光学显微镜观察细胞形态，MTT检测茜草炭不同提取方式药物对损伤细胞存活率的影响，以期筛选出茜草炭最优提取方式，指导后续实验研究。
意义：茜草炭具有良好的化瘀止血活性，但前期研究多是在正常动物上进行，其结果尚不能清晰回答与解决茜草炭化瘀止血的效应物质基础及作用机制等科学问题。
2. 文献综述
止血药对血管保护作用的研究戎腾飞（南京中医药大学， 南京 210000）摘要： 中药止血药历史悠久，种类繁多，广泛的应用于中医临床。
但是考虑到中药复杂的成分，仍有很多机制尚不明确。
本文通过收集整理近年来的文献资料，从血管内皮细胞的损伤机制，来研究中药止血药作用的方向，以期为更深入的科学探究提供一定的依据。
3. 设计方案和技术路线
研究方案：⑴原代人脐静脉内皮细胞的分离与培养⑵ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）损伤模型的建立⑶茜草炭不同极性段提取物对HUVEC损伤的保护作用1.细胞形态学观察2.采用MTT法观察茜草炭不同溶剂提取物对HUVEC活性的影响3.采用硝酸还原酶法测定NO释放量，比色法检测LDH水平，羟胺法检测T-SOD水平，微板法检测MDA水平4.采用ELISA法检测肿瘤坏死因子（TNF-a）、细胞间黏附分子（ICAM-1）的表达技术路线：原代人脐静脉内皮细胞的分离与培养--ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞（HUVEC）损伤模型的建立--茜草炭不同极性段提取物对HUVEC损伤的保护作用--目的：筛选出茜草炭药效作用的最佳提取部位以及其对ox-LDL诱导HUVEC损伤保护作用机制的初步探究
4. 工作计划
2.18-2.28查阅并整理文献资料2.28-3.4 完成开题报告3.4-5.31 进行课题实验6.1-6.7完成毕业论文设计
5. 难点与创新点
建立客观表征出血症的体外生物效应评价体系，采用人脐静脉内皮细胞模型，结合课题组其他成员体内生物活性评价模型研究，以期在整体、组织、细胞及分子等层次上揭示茜草炭化瘀止血作用的物质基础和作用机制。
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