1. 研究目的与意义
内容:1. 运用高效液相及液质联用等技术,将含海蓬子皂苷甲的部位进一步分离纯化;2. MTT法对海蓬子降三萜皂苷进行活性筛选;3. 流式细胞仪观察海蓬子皂苷甲诱导细胞凋亡作用;4. Western blot法观察凋亡通路蛋白的变化,如:caspase家族,Bcl-2家族及mTOR信号通路。
意义:海蓬子作为极具开发潜力的盐生植物资源,富含黄酮类、绿原酸衍生物、多糖类以及三萜皂苷类等多种生物活性化合物,显示出明显的降糖、降血脂、抗炎、抗肿瘤、抗氧化以及免疫调节等药理活性,目前各方面研究都还尚浅,它潜在的药用价值还远未被开发。
深入探讨海蓬子降三萜皂苷的抗肿瘤活性,进而阐明其作用机制,对明确临床适应证、开发具有一定市场竞争力的高科技产品具有十分重要的学术价值和较高的经济与社会意义。
2. 文献综述
文献综述尹晶晶1、以人参皂苷为例的三萜苷类化合物研究进展三萜苷类化合物大多可溶于水,因为其水溶液经振摇能产生大量持久性肥皂样的泡沫而被称为三萜皂苷。
三萜皂苷多有羧基,所以又常被称为酸性皂苷。
人参皂苷是五加科(Araliaceae)植物人参(Panax ginseng C. A. Mey.)、西洋参(Panax quinquefolium L.)、三七(Panax notoginseng(Burk.) F.H. Chen)和葫芦科(Cucurbitaceae)植物绞股蓝(Gynostemmapentaphyllum (Thunb) Makino.)等常见药材的重要活性成分[1]。
4. 工作计划
一、海蓬子皂苷甲分离纯化2022.01-2022.02结合HPLC等技术得到高纯度的海蓬子皂苷甲单体。
二、MTT法活性筛选2022.03筛选具有抗肿瘤活性的单体皂苷;摸索确定适宜的给药浓度。
三、流式细胞仪观察细胞凋亡2022.04流式细胞仪观察海蓬子皂苷甲诱导细胞凋亡作用四、Western blot法观察凋亡通路蛋白的变化2022.04-2022.05对海蓬子降三萜皂苷抗肿瘤机制进行研究。
5. 难点与创新点
一方面,国内对海蓬子的药理活性物质研究是二十一世纪才开始的一项研究,不论是活性化合物的发现分离还是对其药理活性和作用机制的研究都还尚浅,这意味着我们还有很大的探索空间。
另一方面,近年来,人们对北美海蓬子药理活性研究主要集中在抗菌、抗炎、抗氧化、抗凝血活性,但抗肿瘤活性研究较少。
本课题对海蓬子降三萜皂苷的抗肿瘤活性和机制进行深入研究,为其抗肿瘤机制的确立奠定基础,为开发抗肿瘤新药提供依据。
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