1. 研究目的与意义
中药中糖分测定方法有苯酚-硫酸法、蒽酮-硫酸法、3,5-二硝基水杨酸法等化学法，气相色谱法、高效液相色谱法、体积排除色谱法等色谱法，毛细管电泳法及其他一些方法。
薄芝糖肽注射液是一种由GC1菌株经液体发酵培养法制得的灵芝属薄树芝[Ganodermacapense(Lloyd)Teng]干燥菌丝体粉末中提取制得的灭菌水溶液，其组分为多糖和多肽。具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、调节心血管系统活性、护肝解毒、镇静、降血糖等方面的作用，具有研究价值。
目前薄芝糖肽注射液中多糖的测定方法是用紫外-分光光度计测定无水葡萄糖对照品溶液及供试品溶液的吸光度，制作对照品的标准曲线根据供试品的吸光度从而计算出其中多糖的含量。这种方法虽可测定多糖含量，但没有规避游离糖对其多糖含量测定的影响以及游离糖之间的相互影响；另外，紫外-分光光度计法测定含量不具有专属性，若产品中多糖含量少加入葡萄糖，但此种方法测定不易察觉。由于糖本身不具有紫外吸收和荧光吸收，高效液相色谱仪常用的紫外检测器不能测定其含量；蒸发光检测器是一种通用型的质量检测器，基于不挥发的样品颗粒对光的散射程度与其质量成正比的原理而进行检测，对没有紫外吸收、荧光或电活性的物质以及产生末端紫外吸收的物质均能产生响应，特别适合糖的检测，具有方法简便、灵敏度高、测定速度快的优点。
2. 文献综述
HPLC-ELSD法测定薄芝糖肽注射液中4种游离糖成分
屠玉清*（南京中医药大学，江苏南京210046）
摘要薄芝糖肽注射液中多糖的测定是利用糖的还原性进行测定，其多糖量以无水葡萄糖计，但是其中游离糖对多糖的含量测定有影响,而高效液相色谱-蒸发光散射检测（HPLC-ELSD）法对没有紫外吸收、荧光或电活性的物质以及产生末端紫外吸收的物质均能产生响应，特别适合糖的检测。因此，可选用HPLC-ELSD法测定薄芝糖肽中游离糖成分，从而初步了解薄芝糖肽中游离糖成分的种类和含量；同时也为将来进一步水解多糖测定其多糖组成及含量奠定基础。
3. 设计方案和技术路线
1、文献检索，搜集糖类成分检测方法，综合分析，初定实验方案；
2、熟悉蒸发光散射检测器操作规程；
3、摸索实验条件，优化实验方案；
4. 工作计划
第一阶段（1月2月）：开题报告完成，实验思路形成，方案制定；
第二阶段（3月4月）：初步准备，进行实验条件选择；
第三阶段（4月5月）：进行实验；
5. 难点与创新点
薄芝糖肽注射液中成分为多糖和多肽，其多糖的测定方法是用紫外-分光光度计测定无水葡萄糖对照品溶液及供试品溶液的吸光度，制作对照品的标准曲线根据供试品的吸光度从而计算出其中多糖的含量。这种方法虽可测定多糖含量，但没有规避游离糖对其多糖含量测定的影响以及游离糖之间的相互影响；另外，紫外-分光光度计法测定含量不具有专属性，若产品中多糖含量少加入葡萄糖，但此种方法测定不易察觉。
高效液相色谱法测定含量具有专属性好的特点，但由于糖本身不具有紫外吸收和荧光吸收，高效液相色谱仪常用的紫外检测器不能测定其含量；蒸发光检测器是一种通用型的质量检测器，基于不挥发的样品颗粒对光的散射程度与其质量成正比的原理而进行检测，对没有紫外吸收、荧光或电活性的物质以及产生末端紫外吸收的物质均能产生响应，特别适合糖的检测，具有方法简便、灵敏度高、测定速度快的优点。
本实验采取高效液相色谱-蒸发光散射检测法同时测定薄芝糖肽注射液中D-无水葡萄糖、D-甘露糖、半乳糖、蔗糖四种游离糖类成分，初步了解薄芝糖肽中游离糖成分的种类和含量；同时也为将来进一步水解多糖测定其多糖组成及含量奠定基础。
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