1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
黑麦(Secale cereale L.; 2n = 14, RR)是一种异交的,具有耐旱和耐贫瘠以及其它的生物和非生物胁迫。
它是重要的作物,一般被用来做面包,酿酒和饲料。
最近它作为作物在生物量方面也被关注。
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2. 研究的基本内容和问题
1、研究目标根据荆州黑麦转录组数据设计引物,分析其扩增特点和可转移性,筛选荆州黑麦特异标记并利用辉县红-荆州黑麦异染色体系进行染色体定位。
2、研究内容2.1对前人设计和本研究合成的引物进行扩增分析,分析其扩增特点和可转移性,筛选荆州黑麦特异标记。
2.2 利用一套辉县红-荆州黑麦异染色体系,对筛选出的专化标记进行染色体定位。
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3. 研究的方法与方案
1.研究方法:DNA提取:黑麦总基因组DNA提取采用SDS法,具体步骤如下:①称取2-4 g小麦叶片,放入研钵中,加液氮后充分研磨。
②转入20 ml(约样品的一倍体积)DNA提取液中,混匀,65 ℃水浴振荡 (301-501 rpm)1 h左右。
③取出冷却至室温,加入等体积氯仿/异戊醇(24:1)混合液,充分混匀后, 室温振荡1 h左右使之完全混合。
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4. 研究创新点
筛选一批新的荆州黑麦染色体特异标记,为荆州黑麦染色体物理图谱的构建提供基础,并且还有利于新的荆州黑麦染色体结构变异体的筛选。
5. 研究计划与进展
研究计划:利用基于RNA-seq开发设计的PCR引物对普通小麦辉县红、荆州黑麦和辉县红-荆州黑麦双倍体荆辉1号进行扩增,筛选荆州黑麦染色体特异标记。
后利用一套辉县红-荆州黑麦异染色体系,对筛选出的专化标记进行染色体定位。
预期进展:筛选荆州黑麦染色体特异标记,并利用染色体结构变异体进行染色体定位。
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