1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等（列出主要参考文献）1.本课题研究意义杂交水稻是我国最主要的粮食作物，杂交水稻种子是水稻生产中最基本的生产资料，是农业再生产中的关键因素。
种子质量的高低直接影响农作物产量和农产品的质量，而种子真实性和种子纯度是衡量种子质量的主要指标，也是种子质量控制中最棘手的问题。
由于机械混杂、生物学混杂及经营者的掺假等因素，导致杂交稻种子的纯度和真实性受到严重影响使国家和农民的利益受到极大的损害，成为良种推广，全国水稻总产提高的一大潜在障碍，因此，在销售和使用前必须对种子的真伪性和纯度进行鉴定，建立一套快速、准确、经济的种子真实性及纯度检测技术体系，是规范种子市场和促使我国种子产业参与国际竞争的迫切需要。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：通过聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（SDS-PAGE）来区分杂交水稻种子中储藏蛋白（球蛋白、谷蛋白、醇溶蛋白、清蛋白）的多态性，并用其检测种子真实性和纯度。
1.明确杂交水稻总蛋白、球蛋白、谷蛋白、醇溶蛋白和清蛋白在品种真实性和纯度中应用的可能性，以及它们之间多样性的差异。
（种子真实性是指一批种子所属品种, 种或属与文件(品种证书、标签等)是否相同;品种纯度是品种在特征特性方面典型一致的程度）2.在此基础上，构建多样性最好的那类蛋白应用在水稻不同品种之间真实性和纯度鉴定中的方法。
3. 研究的方法与方案
研究方法：采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（SDS-PAGE）对从种子中提取出的蛋白进行电泳检测，之后对其条带进行分析。
主要技术：聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（SDS-PAGE）蛋白的提取及电泳样品的准备：（1）将每粒种子充分研磨成粉末，置于1.5 mL离心管中，加1mL蛋白提取液放于37℃摇床提取1h；（2）4 ℃，12000 rpm离心15 min，取上清；（3）取100μL相同浓度的样品按4:1比例加入样品缓冲液；（4）样品充分涡旋混匀并煮沸3～5 min待用。
SDS-PAGE电泳过程：（1）配置分离胶，加入过硫酸铵和TEMED后，轻轻搅拌使其混匀（过硫酸铵现配现用，操作时戴手套）；（2）小心将凝胶溶液加入模具中（凝胶溶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm处）；（3）轻轻在分离胶缓冲液上均匀覆盖一层水饱和异戊醇，静置30 min，待分离胶凝固；（4）倒去分离胶上的异戊醇并用蒸馏水缓慢冲洗两遍，用滤纸吸干胶面上的残留水分，灌入配置好的浓缩胶，插入梳子，静置20 min至浓缩胶凝固；（5）小心拔出梳子，将缓冲液加入内外电泳槽中，用微量进样器赶走加样孔中的废胶和气泡；（6）将准备好的样品加入进样孔，接通电源，电泳条件开始设为恒压60V，待溴酚蓝带完全进入分离胶后，电压加倍；（7）当溴酚蓝带距玻璃板下沿1 cm处时结束电泳，取出凝胶并做好标记；（8）蒸馏水洗1～2次，室温摇床固定30min，弃去固定液，放入适量考马斯亮蓝R250或G250染色30 min~ 2 h（视具体染色情况而定），换上脱色液，摇动脱色至条带清晰条带；（9）将凝胶放入天根凝胶成像系统中拍照扫描。
4. 研究创新点
（1）试验材料有创新。
选用市场上销售量较大、品质优良且有代表性的水稻品种。
（2）思路上有特色。
5. 研究计划与进展
研究计划：本课题主要的鉴定试验将在2016-2017年进行。
具体进度安排如下：2016.72016.8 （1）查文献，系统掌握相关知识,试验准备。
2016.82016.9（1）参加实验室相关实验操作。
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