1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
【危害分析】
猪副嗜血杆菌主要发生在断奶后和保育阶段的幼猪,发病率一般在10%-15%,严重时死亡率可达50%。该细菌寄生在鼻腔等上呼吸道内,是属于条件性细菌,可以受多种因素诱发。患猪或带菌猪主要通过空气、直接接触感染其它健康猪,其它传播途径如消化道等亦可感染。只有较大的化验室在做实验室检验,故一般养猪场不易及时得到正确诊断。从该病发病情况分析,主要与猪场的猪体抵抗力、环境卫生、饲养密度有极大关系,如果猪发生过蓝耳病等,抵抗力下降时,副嗜血杆菌易乘虚而入;猪群密度大,过分拥挤,舍内空气混浊,氨气味浓,转群、混群或运输时多发。猪有呼吸道疾病,如支原体肺炎、猪流感、伪狂犬病和猪呼吸道冠状病毒感染时,副嗜血杆菌的存在可加剧它们的病情,使病情复杂化。
急性病例往往首先发生于膘情良好的猪,病猪发热、体温升高至40.5℃-42.0℃,精神沉郁、反应迟钝,食欲下降或厌食不吃,咳嗽、呼吸困难,腹式呼吸、心跳加快,体表皮肤发红或苍白,耳梢发紫,眼睑皮下水肿,部分病猪出现鼻流脓液,行走缓慢或不愿站立,出现跛行或一侧性跛行、腕关节、跗关节肿大,共济失调,临死前侧卧或四肢呈划水样。有时也会无明显症状而突然死亡,严重时母猪流产。在发生关节炎时,可见一个或几个关节肿胀、发热,初期疼痛,多见于腕关节和跗关节,起立困难,后肢不协调,直至衰竭而死亡。
2. 研究的基本内容和问题
【目标】
建立副猪嗜血杆菌主要流行血清型的PCR分型方法并在实际中应用。
【内容】
3. 研究的方法与方案
【研究方法】
细菌的分离培养鉴定、PCR、凝胶电泳、胶回收等。
【实验方案】
4. 研究创新点
目前主流的分型方法为琼扩实验和血凝实验等,此类方法十分繁琐,耗时长,结果也未必乐观。构建PCR分型方法将快速准确简便地分型HSP。若使用多重PCR将更加简便。
5. 研究计划与进展
【研究计划】
1. 对实验室冻存菌株的分型
2. 对猪场采集病料分离出的HPS分型
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