1. 研究目的与意义
大肠杆菌(E. coli)为埃希氏菌属(Escherichia)代表菌。
一般多不致病,为人和动物肠道中的常居菌,在一定条件下可引起肠道外感染。
某些血清型菌株的致病性强,引起腹泻,统称致病性大肠杆菌。
2. 研究内容和预期目标
本实验将大肠杆菌进行24小时培养计数,并对其进行55摄氏度水浴加热十分钟处理后计数,并对热处理后的菌进行24小时培养。
对大肠杆菌重复进行如此操作,然后以每24小时培养的经过热处理前、后的菌落数为数据,取其对数值作商,观察多个商值的变化趋势。
以热处理的时间为分子,菌落数对数值之商为分母,可以得到特定温度下的D值,以D值和热处理次数为纵、横坐标作图判断热处理对大肠杆菌的改变,分析大肠杆菌热抗性受到的影响。
3. 国内外研究现状
随着生活水平提高,人们越加重视食品安全。
大肠杆菌是食品中常见的一种污染菌,而国家标准对食品中检出大肠杆菌有限量标准,因此研究出既达到热处理要求,又可以使食品的质量因素变化的合理热处理温度,就必须研究大肠杆菌的的耐热性。
国内外研究人员普遍认为大肠杆菌耐热性与组成生命体生物分子的热不稳定性有关。
4. 计划与进度安排
一、取经过24小时,36摄氏度,80r/min条件培养的大肠杆菌原液,一部分进行平板计数,一部分进行55摄氏度水浴加热处理10min;二、对热处理的菌液一部分进行平板计数,一部分(1ml)进行36摄氏度,80r/min条件下24小时培养;三、培养后的菌液按照一和二中的操作继续培养,重复10-15次;四、用热处理前后的菌落数来计算D值,作图分析。
5. 参考文献
[1] Rivalain, N., Roquain, J., Demazeau, G. Development of high hydrostatic pressure in biosciences: Pressure effect on biological structures and potential applications in Biotechnologies. Biotechnology Advances, 2010, 28(6), 659-672. [2] Ishimori, T., Takahashi, K., Goto, M., Nakagawa, S., Kasai, Y., Konagaya, Y., Batori, H., Kobayashi, A., Urakami, H. Synergistic effects of high hydrostatic pressure, mild heating, and amino acids on germination and inactivation of Clostridium sporogenes spores. Applied and Environmental Microbiology, 2012, 78(23), 8202-8207.[3] Follonier, S., Panke, S., Zinn, M. Pressure to kill or pressure to boost: a review on the various effects and applications of hydrostatic pressure in bacterial biotechnology. Applied Microbiology and Biotechnology, 2012, 93(5), 1805-1815. [4] Bang, W. S., Chung, H. J. Effect of high hydrostatic pressure on the enzyme activities in Saccharomyces cerevisiae and Escherichia coli. New Biotechnology, 2010, 27(4), 440-444. [5] Gervilla, R., Ferragut, V., Guamis, B. High pressure inactivation of microorganisms inoculated into ovine milk of different fat contents. Journal of Dairy Science, 2000, 83(4), 674-682.
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