肉制品中氯霉素酶联免疫快速检测方法研究开题报告

 2022-08-08 09:31:22

1. 研究目的与意义

食品安全问题与我们的生活息息相关,直接影响到我们的身体健康和生命安全,是关乎我们切身利益的重大社会问题。随着社会的不断发益频发食品安全问题令人担忧。氯霉素在我国畜牧业中广泛应用,对畜禽的疾病控制和治疗起到了重要作用。随着氯霉素的大量使用人们发现了氯霉素存在严重的副作用, 氯霉素类药物尤其是氯霉素在动物组织中的残留不仅对动物和人体有直接危害,长期微量摄入氯霉素使沙门氏菌、大肠杆菌产生耐药性,还会造成机体正常菌群失调,对人类的健康构成巨大的潜在危胁。随着安全事件的不断发生,食品的快速检测技术体现了它的重要作用。氯霉素快速检测技术只需要简单处理样品,检测成本相对较低,并且能够在短时间内获得检测成果,对仪器设备和操作人员的水平要求较低。快速测技术在应对突发性食品安全问题,能够最大限度地减少甚至避免各类食品安全事件带来的损害。动物养殖过程中饲料添加剂的残留是导致食品安全问题的重要因素之一,给人们身体健康带来严重威胁。因此,为了确保消费者的身体健康,建立一种针对食品接触材料中的杀菌剂高效、灵敏的快速检测方法从而对其进行监控具有十分重要的意义。

氯霉素抗菌谱广、疗效佳而且价格低廉而广泛用于兽医临床和动物饲料添加剂,但对人体健康造成极大威胁。准确安全的氯霉素检测技术是对食品安全的保障,因此建立简单、高效、灵敏度高且成本低的ELISA检测方法具有一定的研究价值和意义。

本实验的目的是检测肉制品(以猪肉为样本)中氯霉素含量,通过氯霉素单克隆抗体,建立间接ELISA实验方法,通过对样本及酶抗稀释液进行一些优化,从而保证实验灵敏度、准确度的的优化条件下,建立起氯霉素的标准曲线,并确定其IC50为0.15及检测限为0.02μg/L。

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2. 研究内容和预期目标

(1)研究内容:本实验通过研究氯霉素的性质及其危害,酶联免疫快速检测方法的原理及其操作步骤,并进一步研究不同酶、抗浓度对氯霉素标准曲线的影响,以及研究样本处理过程中不同pH、甲醇浓度、标准品稀释液浓度对样本回收的影响,从而得到最佳的标准曲线与样本回收率所需要的各个影响因素的标准值。

(2)拟解决关键问题:通过研究不同影响因素对氯霉素样本回收率的影响确定保证最佳回收率时所需要的各个影响因素的标准值,从而能快速检测肉制品中氯霉素残留含量是否超标提供基础。

(3)写作提纲:

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3. 国内外研究现状

氯霉素类抗生素是一种由委内瑞拉链霉菌(Streptomyces venezuela)中分离提取的广谱抗生素。

对许多需氧革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌、厌氧的拟杆菌、立克次氏体、衣原体及菌质体都有抑制作用,尤其对沙门氏菌属、流感杆菌和拟杆菌属等有良好的抗菌能力。

但不久即发现少数病人应用氯霉素后出现再生障碍性贫血。

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4. 计划与进度安排

研究计划:2022.12.15-2022.1.15:提交开题报告,翻译外文文献

2022.1.1-2022.1.31:实验操作,分析数据

2022.2.1-2022.4.20:撰写论文,提交论文初稿、中期检查表

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5. 参考文献

[1]王玉金,胡宜亮,杨书豪,刘丽.氯霉素残留胶体金免疫层析快速检测法的研制[J].河南科学,2011,29(12):1455-1457.

[2] 徐修远,滑静,胡建民,等.氯霉素在动物体内残留问题的研究进展[J].中国畜牧兽医,2004,31(10): 20-21.

[3] Sykes M, Czymai T, Hektor T, Sharman M, Knaggs M. Chloramphenicol stereoisomers need to be distinguished: consequences observed from a proficiency test [J]. Food Addit Contam Part AChem Anal Control Expo Risk Assess, 2017,34(4):536-541.

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