1. 研究目的与意义
溶血磷脂酸(LPA)为类生长因子的脂类信号分子,血小板和某些炎症细胞,神经细胞,损伤细胞和内表皮细胞受到各种刺激后均可生成,通过内分泌和旁/自分泌的方式释放,主要有血小板,成纤维细胞,癌细胞和脂肪细胞分泌,对细胞的生长、增殖、分化及细胞内信息传递产生多种影响,在维持机体正常的生理功能,壳聚糖具有良好的生物官能性和相容性血液相容性,活化细胞抑制细菌的活性的特点,本课题利用静电纺丝技术制备PCL/PLGA /LPA/壳聚糖核壳结构的纳米纤维复合材料,通过纳米材料研究了静电纺丝支架对成骨细胞增殖、分化,并观察其体外缓释溶血磷脂酸的特性,同时检测其对成骨细胞的增值分化作用同时通过调节加工参数,可以控制药物的释放速率和释放周期,从而有效实现对药物的控制,提高成骨的效果。
2. 课题关键问题和重难点
1,静电纺丝受天气条件影响,丝的成膜性不好 2,LPA的溶解性较差 3,PCL/PLGA/CS互溶性不佳由于静电纺丝与天气的相关性较大,在前期的工作中成膜的效果一直不太好,而且在纺丝过程中出现的喷液,液珠以及丝的整齐性和粗细都不太理想。
在实验中,纺织的PCL/PLGA/CS壳-芯纳米材料中芯的成分LPA的溶解性在起初较好,实验过程中会沉淀或者漂浮黏附在针管壁上。
PCL/PLGA/CS的溶解性一直不太良好,可能与搅拌的时间以及醋酸的量相关。
3. 国内外研究现状(文献综述)
溶血磷脂酸(LPA)对细胞的生长、增殖、分化及细胞内信息传递产生多种影响,在维持机体正常的生理功能,壳聚糖具有活化细胞抑制细菌的活性的特点,本课题利用静电纺丝技术制备PLA/PGA /LPA/壳聚糖核壳结构的纳米纤维复合材料,研究了静电纺丝支架对成骨细胞增殖、分化,观察其体外缓释溶血磷脂酸的特性,并检测其对成骨细胞的增值分化作用。
(1)以PCL/PLGA为原材料制备ES膜三维仿生结构和活性物质便面修复对早期成骨性能的影响;(2)活性物质与PLGA/PCL膜基质共混改性对电纺丝膜结构的影响;(3)PLGA/PCL功能梯度膜促进成骨细胞生长的机制研究。
通过静电纺丝的制备方法,制备了以PCL/PLGA为核,PCL/PLGA/chlorhexidine与PCL/PLGA/β-TCMP为壳的三层复合薄膜。
4. 研究方案
利用静电纺丝技术制备PCL/PLGA /LPA/壳聚糖核壳结构的纳米纤维复合材料,通过纳米材料研究了静电纺丝支架观察其对成骨细胞增殖、分化的效果,同时实验利用CCK8来检验纺丝支架对成骨细胞的增殖效果来反映壳聚糖/LPA的增殖效果是否对细胞起作用
5. 工作计划
第一周 了解课题背景,掌握PGA/PLA/LPA等的物理性质和反应条件第二周 查阅关于PGA/PLA/LPA等的相关资料第三周 完成开题报告第四周 动手操作,选取最合适的溶剂和比例第五周 动手操作,选取最合适的溶剂和比例第六周 筛选最适宜的实验条件和电压流速比例第七周 筛选最适宜的实验条件和电压流速比例第八周 用实验所得成果对成骨细胞进行测试第九周 观察成骨细胞的增殖分化情况第十周 电镜下观察成骨细胞的形态和生长状况第十一周 毕业论文撰写第十二周 毕业论文撰写 由于前期的准备工作已经做完,且实验部分已经陆续进行,虽然实验结果并不如人意,但是在几个月的时间里我已经熟练掌握了实验的过程。
在接下来的时间里我主要是完成实验的核心环节-纺丝,11月-1月这几个月里的天气不适宜纺丝,所以计划在3月-4月这两个月里主要研究纺丝,同时进行细胞实验,并且查阅相关文献以实验过程中可能出现的问题,保证实验的正常进行。
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