高活性单宁降解菌的筛选开题报告

 2023-10-12 08:50:02

1. 研究目的与意义

1.1研究背景

单宁酶能分解单宁酸生成没食子酸和葡萄糖等化合物,伴随着时代发展,人们对生活品质要求普遍变高,单宁酶能广泛应用于茶行业、制革行业、化妆品行业、酒行业等,应用范围十分广泛。单宁酶不仅能分解单宁改善如柿子等果蔬的口味,还能分解制革等废水中的单宁,提高废水处理效率。世界上大部分国家也已对单宁酶的研究做出了重视,目前单宁酶的研究仍在起步阶段,产品较少且产量较低。所以大部分研究还是围绕于寻找单宁酶的高效产酶菌株以及单宁酶的最佳产酶条件并针对其进一步提升产酶效率。

如今,已经有许多学者对单宁酶菌株的筛选有了一定的研究,在筛选高效产酶菌株的方向上有了一定的进展和成果。但仍不能达到单宁酶工业化生产乃至大规模应用的标准,至今仍未能规模化生产。所以本实验致力于从果树土壤中挖掘高效产酶菌株,探寻产酶最高效的菌株,探索其生长及产酶特性,找寻其最佳的产酶条件等,为后续高效产酶菌株的研究提供些许依据。

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2. 研究内容和预期目标

2.1主要研究内容

单宁酶可以降解单宁,生产单宁酶的微生物产酶水平低、成本高,无法满足需求。因此需从自然界中筛选单宁酶高产菌株。本实验研究单宁酶产生菌的分离筛选、单宁酶发酵培养基组份和发酵条件优化、酶的纯化及酶学性质研究。可以采用平板初筛和固体发酵复筛来进行高单宁酶产率真菌菌株的分离,因为真菌类的产单宁酶能力较好,也可以使用双水相技术纯化单宁酶并优化工艺参数。

2.2预期目标

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3. 研究的方法与步骤

3.1采取土壤样本

采取富含单宁的土壤,如石榴树下土壤、茶叶浸泡土壤、杨梅树下土壤、梨树下土壤、李子树下土壤,去除表面浮土,多采一些样。

3.2 制备平板筛选培养基并涂平板初筛

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4. 参考文献

[1] 马万良. 单宁酶产生菌的筛选、发酵优化及酶的纯化研究[D].广西大学,2015.

[2] 郭鲁宏, 杨顺楷. 单宁酶产生菌的筛选和发酵条件研究[J]. 应用与环境生物学报, 1998,4(4):4.

[3] Balakrishnan A , Kanchinadham S , Kalyanaraman C . Studies on the Effect of Bacterial Tannase Supplementation to Biodegradation of Tannins in Tannery Wastewater[J]. Industrial amp; Engineering Chemistry Research, 2021(47):60.

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5. 计划与进度安排

1、2024年2月18日--2024年3月3日 接受任务、查阅和翻译文献、撰写及完成开题报告及任务书。

2、2024年3月4日--2024年3月6日 采集样本土壤;洗三角瓶、培养基等,配置平板筛选培养基并高温高压灭菌,烘干无菌保存。

3、2024年3月7日--2024年3月8日 制备土壤悬液并以不同稀释倍数涂布于初筛平板30度培养72小时。

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