1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
热应激是指在高环境温度中的机体对热环境所做的非特异性的生理反应的总和[1,2]。随着全球变暖，热应激已成为危害畜牧生产的重要因素之一，近年来国内外学者对热应激进行了大量的研究，主要包括：热应激对奶牛产奶量的影响、对乳品质的影响、对奶牛生理指标的影响、对奶牛采食量和消化的影响、对激素代谢的影响以及对繁殖性能的影响等。
虽然当今对缓解热应激已有不少措施，但是在热应激对基因表达上更深层次的影响还有待研究探索。在次方向定能有所突破，大大缓解热应激带来的不良影响。有报道表明在热应激期间荷斯坦奶牛产奶量下降，而下降的采食量和管理因素可以部分解释热应激期间降低的产奶量[3,4]。一些研究还表明，热应激期间乳腺上皮细胞RNA转录和翻译受到抑制，如细胞周期，膜通透性也受到了影响[5,6]。
夏季奶牛采食量下降是引起夏季乳产量下降的一个重要原因，且采食量下降这一因素占高温应激引起乳产量下降比例的35%[7,8]。近年来有研究利用乳腺组织或细胞模拟采食量下降条件下营养素浓度和能量水平对mTOR介导的LKB1/AMPK/mTOR信号通路调控乳蛋白合成的影响。高温应激引起乳产量下降的另一个因素是由于高温应激直接对奶牛生理及代谢产生影响[9]。使用生长激素或生长因子处理泌乳奶牛活体、组织或细胞的研究表明通过对mTOR信号通路介导的mRNA翻译起始和延伸变化的调节提高乳蛋白合成[10]。
2. 研究的基本内容和问题
2.1研究目标：
1)培养较高纯度奶牛乳腺上皮细胞；
2)了解热应激对牛乳腺的潜在影响；
3. 研究的方法与方案
3.1拟采取的研究方法
1)奶牛乳腺上皮细胞的纯化、培养及鉴定：外科手术法釆取乳腺组织，进行原代培养，经3至4次纯化后，可得到纯度较高(大于95%)的奶牛乳腺上皮细胞。上皮细胞经免疫组化鉴定后，可以用于后续试验。
2)提取RNA，利用基因芯片识别差异表达的基因。
4. 研究创新点
从细胞水平，探讨热影响乳腺上皮细胞基因表达的机制。
5. 研究计划与进展
1）2015年9月初到9月下旬查阅相关文献，确立研究方向及内容。
预期:通过查阅文献，和老师的指导，顺利确定课题。
2）2015年10月下旬到12月中旬收集乳腺组织，体外培养乳腺上皮细胞。
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