1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
植物细胞壁多糖作为日粮纤维(dietary fiber) 的主要成分,对人和动物的营养代谢有诸多影响(在文献综述里已作详细描述,在此不再赘述),多糖的理化性质(水溶性、聚集方式和生物可降解性)受其糖残基组成与排列方式、糖苷键连接位置、糖苷键类型 (α 或 β)、侧链与修饰基团的数量等多种因素影响。
而多糖的理化性质又是决定其体内生理活性的直接原因。
就畜禽营养实践而言,日粮纤维的含量与组成分析结果是进行饲料营养价值评价、饲料资源开发与利用和制定营养调控方案的重要参考依据。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标:通过优化和规范胶态 2D HSQC NMR 的测试条件,补充和汇集饲料中常见细胞壁多糖特征结构在 DMSO/Pyridine 体系中的 NMR 化学位移数据,构建饲料多糖特征结构在DMSO/Pyridine 胶态体系中的 NMR 化学位移专用数据库;筛选适宜的参照物,建立一套定量和定性分析饲料多糖胶态 2D HSQC NMR 图谱的方法,为后续研究典型基础,也为相关研究提供公用的参考数据库。
研究内容:1优化和规范胶态 2D HSQC NMR 测试条件:该部分主要包括以下三方面内容。
1.1 适宜取样量与溶剂用量的确定:结合前人研究结果,针对饲料样品的特殊性,制备细胞壁总量浓度在 5.0-100.0 mg/mL的梯度测试样品分别进行测试,通过对比浓度梯度样品的平均信噪比、主要多糖特征结构的信号强度与细胞壁总量浓度间的回归系数和线性变化趋势,确定适宜的细胞壁样品取样量与溶剂用量。
3. 研究的方法与方案
4. 研究创新点
首次将植物细胞壁多糖的胶态 2D HSQC NMR 分析技术用于饲料营养研究,并通过对现有技术参数的优化和相关数据的补充,试图建立适用于饲料多糖研究的新方法。
5. 研究计划与进展
研究计划:2017.05-2017.10 查询相关文献资料,完成文献综述;2017.11-2018.01 制定确定相关的实验方案,通过对制作胶态 2D HSQC NMR 测试样品时适宜的取样量与溶剂用量比例、NMR 脉冲程序优选和脉冲扫描次数的确定,优化和规范测胶态 2D HSQC NMR 试验条件。
2018.03-2018.04 构建专用多糖特征结构在 DMSO/Pyrindine 溶剂体积中的化学位移数据库。
确定用 HSQC 图谱对多糖特征结构进行定量分析的参照物,以及定量分析计算方法。
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