1. 研究目的与意义
近年来，胰蛋白酶广泛应用于食品、医药、化工行业,但由于游离的胰蛋白酶易自消化、稳定性极差，使酶促反应难以控制,催化效率下降,不利于产物的提纯精制,以致成本提高。
酶的固定化就是通过某些方法将酶与载体相结合后成为不溶于含有底物的相中，从而使酶被集中或限制在一定的空间范围内进行酶解反应。固定化胰蛋白酶与游离酶相比，与底物、产物极易分离；可重复利用降低成本；其稳定性会在固定化后得到提高；利用固定化胰蛋白酶反应可以严格控制反应过程，有助于提高产品的质量。本实验对胰蛋白酶的固定化工艺进行优化，将更有利于其在实际生活中的应用。
2. 研究内容和预期目标
本课题以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂，对胰蛋白酶进行固定化。以固定化酶的酶活力为指标，对固定化的PH、戊二醛浓度、交联时间、加酶量等固定化条件进行优化，进而得出固定化胰蛋白酶的最佳工艺条件。对比固定化酶与溶液酶的米氏表观常数，为固定化酶在用用研究提供依据。
写作提纲：1、前言
2、实验材料与仪器
3. 国内外研究现状
蛋白酶(proteases)在工业和生物医学中广泛使用,其中胰蛋白酶备受关注。近年来胰蛋白酶在食品、医药、化工等行业中的应用越来越多。但是由于液相胰蛋白酶的自溶、解折叠以及自聚效应,使得天然酶在应用和储存期间催化活性迅速下降,并难以重复使用,这就限制了其在工业中的应用。酶的固定化技术可克服天然酶的不足,使得固定化的酶稳定性增强,且可重复利用。
影响固定化酶制备的因素很多,包括载体材料的结构和性能、固定化方法、固定化位点、固定化条件等，国内外关于胰蛋白酶固定化研究主要集中在载体选择、固定化条件优化这两个方面。 在胰蛋白酶的固定化条件优化方面目前的研究主要涉及固定化过程中的最适PH值、最适温度、交联剂的种类、交联时间等方面。陈天等人以壳聚糖为载体,制备固定化胰蛋白酶，实验证明,以戊二醛预交联的网状壳聚糖为载体制备的固定化胰蛋白酶具有更加优良的性能,在最佳固定化反应条件下,酶的活性回收率可达56%。李晓丽等人以介孔分子筛SBA-15作为载体,对胰蛋白酶进行固定化,并对固定化条件进行优化。结果表明最佳条件制备的固定化胰蛋白酶活力可达15.6U/mg，将优化条件制备的固定化胰蛋白酶作为亲和吸附剂,对抑肽酶进行分离纯化，效果较好。
目前,固定化胰蛋白酶的方法很多，但实际应用的却很少，亟待解决的问题还是合适的支持载体和简单的固定化方法的选择。探索胰蛋白酶的固定化载体和固定化方法,制备高活性、高稳定性、高机械强度的固定化胰蛋白酶仍是我们追求的目标。
4. 计划与进度安排
本论文主要对胰蛋白酶的固定化条件进行优化改进，并探讨其酶学特性。实验内容如下：
1、查找文献资料，撰写实验方案
2、以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂，对胰蛋白酶进行固定化
5. 参考文献
1、陈天. 壳聚糖固定化胰蛋白酶的研究[J]. 离子交换与吸附,2002,02:125-131.
2、肖厚荣,王晓葵,宋扬. 胰蛋白酶固定化技术研究[J]. 合肥工业大学学报(自然科学版),1999,S1:94-98.
3、贾少华,吕芳,迟凯月,邓玉林. 胰蛋白酶的固定化及其应用研究[J]. 北京理工大学学报,2014,07:763-766.
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