1. 研究目的与意义
鼠伤寒沙门氏菌,是一群非适应性或泛嗜性的沙门氏菌,具有广泛的宿主,是目前世界各国分离率最高的菌型之一。
该菌能引起各种家禽和哺乳动物的传染病,也可引起人类感染,它是引起食物中毒而发生炎症的有名的细菌,但通过P22噬菌体转导、溶原化变换以及组氨酸操纵子等性状出现的调节机制的分析,也成为了促进微生物遗传学发展的一种重要的细菌。
2. 研究内容和预期目标
鼠伤寒沙门氏菌,Salmonella typhimurium。
是引起急性胃肠炎的主要病原菌之一。
也是微生物遗传学发展的一种非常重要的细菌。
3. 国内外研究现状
目前已知黄芩素对STM的MIC是0.04mmol/L,MBC是0.08 mmol/L;黄芩素可显著抑制STM生长并引起LDH和γ-GT的外泄。
用四重荧光定量PCR法鉴定鼠伤寒沙门氏菌特异好、灵敏高、能够快速检测。
鼠伤寒沙门氏菌能在玻璃表面形成生物菌膜,且随着时间的延长,生物菌膜形成的网状结构更为致密,生物量显著增多。
4. 计划与进度安排
酸适应性诱导:鼠伤寒沙门氏菌经TSB液体培养基及固体平板活化后,挑取单菌落,接种于TSB,37℃摇瓶培养10 h。再按1%接种至50 mL新鲜TSB培养基中(pH7.2),37℃、180 r/min振荡培养2 h后,加入己过滤除菌的柠檬酸调节溶液pH值。参考Leyer等方法,每次以pH5.5培养2 h的细胞作为酸处理样品,以pH7.2 TSB培养基中相同培养条件的细胞作为非酸处理对照。
酸适应性抗性评价实验:将如上方法获得的酸适应性菌和非酸处理对照,l000 r/min离心2 min,分别重悬于生理盐水和HCl调节的pH3.0TSB中。前者作为酸胁迫0 h菌体数;后者为酸胁迫处理,每隔20 min取样,并用灭菌生理盐水10倍梯度稀释,取适宜稀释度菌液平板计数,其与0 h菌体数之比作为该时间点存活率,绘制存活率曲线,评价鼠伤寒沙门氏菌酸适应性。
5. 参考文献
[1]韩洪玲. 不同胁迫处理诱导金黄色葡萄球菌超高压抗性的研究[D].南京财经大学,2017.
[2]胡兴娟,徐君辉,张静,施进,王忠发,沈飚.四重荧光定量PCR法鉴定肠炎、鼠伤寒以及伤寒沙门氏菌[J].食品安全质量检测学报,2019,10(07):1837-1843.
[3]邓一秒,杨璐环,张晓婷,董冬丽,唐书泽.乙醇适应对鼠伤寒沙门氏菌及其菌膜耐致死胁迫的影响[J].中国食品学报,2019,19(09):53-58.
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