1. 研究目的与意义
1.1杏鲍菇（Pleurotus eryngii），又名为刺芹侧耳，属担子菌亚门 (Basidiomycotina) 担子菌纲 (Basidiomycetes) 层菌亚纲 (Hymenomycetes) 无隔担子菌亚纲 (Homobasidiomycetidae)伞菌目 (Agaricales) 侧耳科 (Pleurotaceae) 侧耳属 (Pleurotus) 食用菌，其菇柄口感爽脆、滑嫩，被誉为口味最好的平菇属菌株[1]。杏鲍菇主要生长于北非、中东、欧洲地中海区域等地，而如今，亚洲部分地区也是杏鲍菇的生长地，而在我国境内，杏鲍菇多种植于四川、新疆以及青藏等地区。新鲜的杏鲍菇会散发出淡淡的杏仁和鲍鱼的香气，煮熟后会有典型的菇鲜味散发[2]。杏鲍菇中蛋白质含量高而所含脂肪较少，且拥有丰富的膳食纤维和多糖等成分，具有抗动脉粥样硬化、抗癌、降血糖、抗氧化、增强免疫力等多种生物活性，因其营养成分较高，适合食用的人群广泛，对人体有一定的调节功能，在近年来被称之为“菇中之王”[3]。
1.2β-多糖作为细胞壁最重要的结构物质，是由D-葡萄糖单体以β-糖苷键链接而成的多糖，因其具有改善肠道内失调免疫刺激、抗炎症、抗感染、抗微生物、抗肿瘤、降低胆固醇、抗辐射等生物活性和医学特性，使其作为“生物反应调节剂”而日益引起人们关注，六边的D-葡聚糖环可以在D-葡聚糖环结构的多个位置相互连接，而其中拥有支链的β-葡聚糖多是以β-1,3-糖苷键构成其骨架、β-1,6-糖苷键作为其侧链[4]-[5]。有观点认为分子量、聚合度、支链的分支度、主链糖苷键的链接方式以及多糖的空间结构、单糖组成等对β-葡聚糖的生物学活性有很大影响，即拥有较好生物学活性的β-葡聚糖需要分支度较大、具有3股螺旋结构，分子量大于一定范围[6]。
1.3多糖类物质所含有的生物学活性与多糖的结构、分子量、单糖组成等因素有关，为获得杏鲍菇多糖的结构及组成需对其进行提取纯化，目前常用的多糖提取方法包括有酶提取法、溶剂提取法、超声提取法、微波辅助提取法等，而其中最为常用的方法即为溶剂提取法，包括热水浸提、酸提取、碱提取等，此类方法一般以酸、碱、热水、乙醇等物质作为提取介质，利用多糖在提取介质中的难溶性从而得到结构较为完整、生物学活性较高的多糖物质[7]。本实验采用分级醇沉的方法，通过测定采用不同乙醇浓度梯度所提取得到的杏鲍菇多糖的得率研究出所设的乙醇浓度梯度中提取杏鲍菇多糖的最适乙醇比例，此外对所提取的多糖进行蛋白含量测定、红外扫描、紫外扫描、测定杏鲍菇多糖的分子量以及检测杏鲍菇多糖的单糖组成分析多糖的组成和结构，供提高杏鲍菇多糖的提取效率及分析其活性，从而更好的利用杏鲍菇资源、提升其利用价值。
2. 研究内容和预期目标
2.1 研究内容：本实验通过改变乙醇浓度对多糖进行分级醇沉，对分级醇沉所得到的多糖的成分进行分析并通过MTT法研究不同醇沉组分多糖对RAW 264.7巨噬细胞增殖的促进作用。
2.2 关键问题：对不同醇沉组分多糖的成分分析以及MTT实验。
3. 国内外研究现状
3.1杏鲍菇于上世纪90年代引进我国栽培，而如今杏鲍菇已是继金针菇后我国的第二大周期性工厂化生产的食用菌[8]。目前我国杏鲍菇的工厂化生产主要为袋装模式，并以瓶载模式为辅；而对其原料配方，不同于韩国木屑由专门的供应商按采购方案提供配方进行混合配置，在我国，杏鲍菇原料都是分开采购，到厂后根据原料特性和栽培工艺需求进行预处理[9]。如今，欧洲的双孢蘑菇工厂化栽培是世界上食用菌产业发展的最好的技术，其次是日本的木腐生菌工厂化栽培；而相比之下，国内技术开发能力低下、技术效益极小，杏鲍菇菇品主要用作鲜食，部分加工成即食食品和罐头食品。菇品的开发明显不足[9]，因此本研究对杏鲍菇的开发利用有一定的意义。
3.2杏鲍菇多糖的提取方法十分多样，其中最常用的就是水提醇沉法，还有利用微波、超声波辅助法、酶解等方法辅助提高多糖提取率，此外超临界流体萃取法、凝胶过滤法、双水相萃取等方法也可以用于杏鲍菇多糖的提取[10]。而使用的多糖提取方法不同，其得率也有所不同。
3.3 据研究发现，杏鲍菇中所含的生物活性物质主要是其所含的多糖。经研究发现，杏鲍菇多糖主要含有抗肿瘤[11]、抑菌[12]、抗氧化[13]、降血脂[14]、抗病毒[15]等生物活性。而用不同提取方法所提取的多糖其得率及结构也不同。水提醇沉法作为最常用的杏鲍菇多糖提取方法，研究其得率最高的提取条件从而提升多糖利用率，对扩宽杏鲍菇多糖的使用范围、更好地利用杏鲍菇资源以及相关产品的研发具有重要意义。4. 计划与进度安排
1、2022.12-2022.01
确定课题研究计划，搜集、查阅相关文献资料；对整体研究课题进行初期规划，然后进行系统性总结；完成课题的开题报告。
3、2022.01-2022.03
5. 参考文献
[1]李树锦,李海强,孙国娟,刘海涛,王艳清,崔承弼.杏鲍菇多糖研究进展[J].现代农业科技,2012(04):43-44 49.
[1]Yong-Tae Jeong, Sang-Chul Jeong, Young-Ah Gu, et al.Antitumor and immunomodulating activities of endo-biopolymers obtained from asubmerged culture of Pleurotus eryngii. 2010, 19(2):399-404..
[3]荣瑞芬,李鸿玉,叶磊,厉重先,李丽云.杏鲍菇营养及功能成分分析测定[J].亚太传统医药,2007,(05):85-87.
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