1. 研究目的与意义
内容:
1、整理LHRH-PE40摇瓶实验方法文献
2、选择常见的5种摇瓶条件进行单因素实验:培养基、初始pH、诱导温度、诱导浓度、诱导时间
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2. 文献综述
LHRH-PE40的应用及发酵工艺研究的概况
胡 力
摘 要:目的 了解LHRH药代动力学及LHRH-PE40与受体的特异性结合及细胞毒作用,及LHRH-PE40发酵条件优化的研究。方法 对近年来国内有关LHRH-PE40的文献进行归纳总结,并对其发酵工艺摸索与探究,确定出最佳摇瓶条件,以提高目的蛋白的表达。
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3. 设计方案和技术路线
研究方案:
LHRH-PE40甘油菌接种于一定的培养基中,过夜培养,接种培养罐中,培养至一定OD600值时,诱导剂诱导,诱导一定时间后结束培养,离心后取沉淀,沉淀送检电泳分析目的蛋白纯度来确定最佳培养基、初始pH、诱导时间、诱导浓度、诱导温度。
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4. 工作计划
2022.01~2022.03 查阅文献、学习知识、研究设计方案
2022.03~2022.05 进行重组人促性腺激素释放激素-绿脓杆菌外 毒素A双突变体融合蛋白摇瓶工艺的优化实验
2022.05~2022.06 整理数据、分析实验结果、撰写毕业论文5. 难点与创新点
重组人促性腺激素释放激素-绿脓杆菌外毒素A(LHRH-PE40)是通过融合蛋白技术,由大肠杆菌表达的靶向杀伤肿瘤细胞的重组毒素,由导向部分LHRH 和毒性部分PE40 共同组成,可与癌细胞表面特异性表达的LHRH 受体结合,通过细胞内吞作用摄入并发挥对肿瘤细胞的杀伤作用。
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