1. 研究目的与意义
内容：中国传统医学一直对保健养生倍加关注，传承下来的观念和经验也相当丰富。
二至丸从补肝益肾、滋阴养血立意，又采一阳初动的女贞子和阴气微降的墨旱莲入药，取其滋养肝肾的功效。
本文在药理学相关研究的基础上，采用D-半乳糖诱导的大鼠肝细胞衰老模型，验证二至丸抗肝细胞衰老体外作用，通过倒置光学显微镜观察细胞形态检测细胞活性，β-半乳糖苷酶染色检测衰老，指导后续实验研究。
2. 文献综述
细胞衰老模型的研究进展摘 要衰老是生物体全身各组织、器官的退化性变化，是许多病理、生理过程综合作用的结果。
从古至今，人们不断探究着如何才能延年益寿和长生不老。
半个多世纪以来，细胞老化研究自单纯的自发性老化模型拓展至多种应激诱发细胞老化模型，细胞老化与衰老之间的关系日益引起人们关注。
3. 设计方案和技术路线
研究方案：1.材料：1.1 细胞株：BRL大鼠肝细胞株1.2 药物与试剂：女贞子饮片；墨旱莲饮片；超纯水；PBS；高糖DMEM；25％胰蛋白酶；胎牛血清；D－半乳糖；细胞衰老β－半乳糖苷酶染色试剂盒；FDG；荧光素；SOD、GSH-px、MDA。
1.3 仪器：CO2恒温培养箱；超净工作台；倒置显微镜；倒置荧光显微镜；微量振荡器涡旋混匀器；低速台式离心机TDL-80-2B；电热恒温水浴锅；高压灭菌锅；Milli-Q 超纯水系统；NewClassicMS型分析天平（d=0.01mg）；KH-500B型超声清洗器；TE-canPro200酶标仪；Enspire多模式微孔板检测仪；FA1104N型分析天平（d=0.1 mg）；B6型震动超细微粉碎机；LS13-320激光粒度分析仪。
2.方法：2.1 二至丸的制备：2.1.1 酒女贞子超微粉体的制备：取酒女贞子饮片，超微粉碎30分钟得到酒女贞子超微粉体。
4. 工作计划
2022年1月-2022年3月：进行文献检索，综述撰写，整理文献资料。
2022年3月-2022年4月：完成开题报告。
2022年4月-2022年5月：进行课题研究。
5. 难点与创新点
基于引发衰老的自由基理论，建立D-gal诱导BRL细胞的衰老模型，研究不同浓度的二至丸对细胞的抗衰老作用。
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