1. 研究目的与意义
1. 内容：选取结直肠癌细胞株CaCo-2、HT-29、HCT-116、LoVo，采用MTT检测筛选敏感细胞株并计算IC50，通过实验观察细胞形态的变化、对细胞自噬的影响、对自噬相关蛋白的影响以及对相关信号通路的影响，对消癌解毒方抑制结直肠癌细胞增殖的机制进行探讨。
2. 意义：结直肠癌（Colorectal cancer, CRC）是最常见的消化道恶性肿瘤，已位居恶性肿瘤死亡原因的第3位。
全世界每年新增120多万CRC患者，且因其病发隐匿，多数患者在确诊时就已处于晚期，造成每年有至少60万人死亡。
2. 文献综述
自噬对肿瘤细胞凋亡的影响梅蓉蓉（南京中医药大学）摘要：自噬和凋亡是细胞程序性死亡的两种类型，均与一系列基因的激活、表达和调控相关。
自噬性细胞死亡在参与细胞存活、分化、增殖和衰老的同时还可能参与多种疾病的发生发展，在肿瘤细胞中也具有非常重要的作用。
自噬与凋亡在发生过程中存在着某些交叉关系，使二者之间能够发生相互作用，而这种相互作用又对肿瘤的发展产生复杂的影响。
3. 设计方案和技术路线
研究方案： 1. 选取结直肠癌细胞株：CaCo-2、HT-29、HCT-116、Lovo2. 检测细胞抑制率：MTT法检测，取对数生长期的细胞，PBS漂洗，胰蛋白酶消化后终止消化并离心，培养基重悬，细胞计数后以1105 个/ml接种于96孔板，每孔100 μl，设5复孔。
24 h细胞贴壁后，分别加入不同浓度的药物，孵育24h、48h、72h后，各孔加入MTT（5 mg/ml）20μl，孵育箱孵育4 h后弃去上清，每孔加DMSO 150μl，避光震荡10 min充分溶解沉淀后，酶标仪560 nm处检测吸光度。
细胞增殖抑制率（%）=[（OD对照组-OD给药组）/OD对照组] 100%。
4. 工作计划
2月20日-3月5日 查找文献，设计试验方案3月6日-3月31日准备实验材料并学习实验相关操作4月1日-5月10日进行实验5月11日-5月20日实验数据处理5月21日-6月5日整理资料，撰写论文
5. 难点与创新点
自噬发生发展过程与中医的气虚痰瘀、阴阳自和平衡、肝主疏泄等理论相通。
研究证明中医药的有效成分和复方对肿瘤自噬有多方面的影响，对卵巢癌、口腔癌、脑瘤、肝癌、结肠癌、肺癌、胰腺癌、胃癌、乳腺癌等抑制肿瘤增殖和促进细胞凋亡过程中发挥着重要作用。
消癌解毒方以白花蛇舌草、山慈菇清热解毒；半枝莲、莪术化痰散结；太子参、麦冬益气养阴。
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