1. 研究目的与意义
内容:1、通过ScFv-Var5(抗血管紧张素)菌体的包涵体,介绍本实验的蛋白纯化工艺。
2、本实验主要研究过程:高压破菌(压榨)→离心→包涵体洗涤→包涵体变性→纯化→Q层析。
3、列出每一步所需的仪器与型号、试剂厂家等实验条件,并附上实验结果(电泳图)以供比较。
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2. 文献综述
融合表达抗血管紧张素受体单克隆抗体改构体纯化工艺的研究进展[摘要]随着社会文明的不断进步发展,健康问题日益成为大家关注的焦点。
抗体等一些医学词汇也变得让大家耳熟能详,这都得益于其在疾病的诊断、治疗、预防中发挥着越来越重要的作用。
其生产制备经历了两个阶段,包括抗血清多克隆抗体和单克隆抗体,如今已进入了基因工程抗体的时代,包括单链抗体ScFV,Fab抗体,F(ab)2抗体等小分子抗体、嵌合抗体和改形抗体。
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3. 设计方案和技术路线
湿菌体高压破菌(菌体重悬、菌体压榨)破菌后离心包涵体洗涤包涵体变性纯化Q层析
4. 工作计划
2022年1月12-3月4号:查阅Su-ScFv-Var5相关资料准备开题报告2022年3月9-4月30号:进行课题的相关实验2022年3月9号-4月30号:做课题的实验2022年5月1-7号:整理分析相关实验数据2022年5月8-31号:撰写论文
5. 难点与创新点
1.单克隆抗体的轻链和重链的可变区通过氨基酸相连成单链抗体,易于在原核生物中表达2.SUMO融合表达易于与Q亲和纯化
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