1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
本课题的意义、国内外研究概况、应用前景等（列出主要参考文献）紫花苜蓿作为世界和我国栽培最为广泛的优质豆科牧草,具有适应性广、产量高、营养价值丰富、土壤固氮等优点，在草牧业发展和草地生态建设中发挥重要作用。
我国紫花苜蓿的种植地区以西北、华北、东北为主，其中以西北甘肃省种植面积最大，截至2013年达到1120万亩（张洁冰，2015）。
然而，西北地区由于气候干旱、降雨量少，极大影响了紫花苜蓿的生长发育、降低其品质。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标、内容：干旱胁迫显著抑制了豆科牧草紫花苜蓿的生长发育，其生理及分子响应机制尚不十分清晰。
本研究拟构建紫花苜蓿高质量的全长cDNA表达文库，采用酵母体系挖掘耐旱基因并进行表达特性分析。
本项目的实施为紫花苜蓿耐旱分子设计育种提供优异的基因资源。
3. 研究的方法与方案
研究方法：（1）紫花苜蓿全长cDNA表达文库构建采用invitrogen 公司SuperScript Full Length cDNA Library Construction Kit II 和入门载体pDONR/Zeo 重组构建干旱胁迫下紫花苜蓿植株（根茎混合取样）全长cDNA入门文库，提取入门文库质粒。
入门文库质粒与酵母表达载体pDEST52进行LR重组反应，电转化大肠杆菌构建cDNA表达文库并提取文库质粒。
（2）文库转化及抗旱基因筛选将文库质粒通过PEG/LiAc化学转化法，转化到干旱敏感酵母菌株hos1，构建农杆菌混合文库，然后通过花絮浸染法转化拟南芥植株，通过抗性筛选获得拟南芥转基因株系。
4. 研究创新点
紫花苜蓿是一种高蛋白的优良豆科牧草，具有较高的饲用价值，是当今世界分布最广的栽培牧草，也是世界上第一个被人工栽培的牧草，在我国已经有两千多年的栽培历史，被誉为牧草之王。
紫花苜蓿在中国西北地区种植较多，而西北地区干旱、少雨，对作物的正常生长发育都非常不利。
干旱是影响植物生长发育及作物产量的逆境因素之一，干旱胁迫显著抑制了豆科牧草紫花苜蓿的生长发育，其生理及分子响应机制尚不十分清晰。
5. 研究计划与进展
（1）2017.1-2017.3：紫花苜蓿材料的准备、干旱处理后RNA提取、全长cDNA植物表达文库的构建。
（2）2017.4-2017.12：酵母筛选质粒文库、获得抗旱株单克隆，并经PCR扩增抗旱基因的表达分析。
（3）2018.1-2018.6：论文撰写，完成答辩。
以上是毕业论文开题报告，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
