1. 研究目的与意义
内容:本篇论文通过用摇瓶发酵技术来探讨抗血管紧张素受体单克隆抗体改构体最佳的表达条件,探究最佳的表达pH、诱导温度、诱导时间、诱导剂浓度 、诱导剂的种类、培养基和大肠杆菌的生长密度等因素
意义:本论文用摇瓶发酵的方法来探讨表达抗血管紧张素受体单克隆抗体改构体蛋白的最有利条件,为大型工业化生产提供实验基础和有效的 数据 ,从而避免原料的浪费和更加高效大量的生产抗血管紧张素受体单克隆抗体改构体蛋白结果的测定分析和筛选是通过菌体密度测定值和蛋白表达量的测定值来决定的
2. 文献综述
乳腺癌是全世界女性最常见的恶性肿瘤。据世界卫生组织国际癌症研究中心(InternationalAgency for Research on Cancer,IARC)统计,2008年全球女性乳腺癌新发病例达138万,占全部女性恶性肿瘤发病的22.9%;46万女性因乳腺癌死亡,占所有女性恶性肿瘤死亡的13.7%,占所有女性死亡的1.7%[1]。据统计,我国每年女性乳腺癌发病16.9万,是女性第二位最常见恶性肿瘤;我国女性中因乳腺癌疾病死亡的约有4.5万,是女性第六位最常见的恶性肿瘤死亡原因[2]。乳腺癌的发生与环境、生活方式密切相关,营养干预、减少超重和肥胖已被证实是有效的一级预防措施[3]。同样可以通过人群筛等手段查有效降低乳腺癌死亡率,提高成活率和生存环境。解析中国女性乳腺癌的发病风行状况和疾病特点,对于拟定实行预防掌控乳腺癌等肿瘤疾病的措施尤为重要[4]。
乳腺癌已成为如今社会的极为严重公共卫生问题[5]。自20世纪90年代全世界乳腺癌死亡率呈现出渐渐降低态势;究其原因,一是大范围展开了乳腺癌的普查工作,发现了大量初期病例,有助于展开早期医治;第二是因为乳腺癌综合医治的开展,提高了乳腺癌的存活率。乳腺癌已成为医治效果最好的实体肿瘤之一。
因此,近几年来就如何有效的治疗乳腺癌等肿瘤疾病,引起了医学界、科技界高度重视。随着科学技术的进步,医疗技术的发展,乳腺癌等肿瘤的形成机理被进一步探明,对相应的乳腺癌类肿瘤治疗药物,也进行了深入的研究。而抗血管紧张素受体单克隆抗体蛋白具有良好的抗肿瘤和治疗乳腺癌的作用,作为用于治疗乳腺癌等肿瘤类疾病的药物具有着很好的开发潜力,如何提高含有抗血管紧张素受体单克隆抗体蛋白的大肠杆菌的蛋白表达能力是很重要和创新的课题。
3. 设计方案和技术路线
菌种选择和仪器选择→①不同培养基的影响→②pH的筛选→③诱导温度的筛选→④诱导时间的选择→⑤诱导密度的筛选→⑥IPTG浓度对诱导蛋白的筛选→⑦乳糖诱导浓度的筛选→⑧诱导剂的筛选→分析总结确定最佳条件
4. 工作计划
2022年2-3月:查阅文献,建立数据库,采购材料,准备试验所需的仪器设备成立实验组
2022年3-5月:建立菌体模型培养,研究最佳制备条件,对(培养基、诱导温度、诱导时间、pH条件、大肠杆菌的生长密度、诱导剂种类、诱导剂浓度)等参数分析并进行比较,确定最佳分析参数、建立分析方法
2022年5-6月:对试验后菌体进行比较分析,并对结果进行数据处理,鉴定优化最佳的蛋白表达目的条件和影响因素,总结和整理数据,完成论文。5. 难点与创新点
抗血管紧张素受体单克隆抗体蛋白具有良好的抗肿瘤和治疗乳腺癌的作用,作为用于治疗乳腺癌等肿瘤类疾病的药物具有很好的开发潜力。
如何提高含有抗血管紧张素受体单克隆抗体蛋白的大肠杆菌的蛋白表达能力是很重要和创新的课题
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